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花叶络石的养殖方法

生长与分化
1.无菌材料的获得
选取一年生幼苗生长健;仕无病虫害的母株,切取当年萌发之春梢先端,去除叶片,保留叶柄,将枝条截成2—3cm的小段。消毒时先用10%洗衣粉溶液浸泡15min,然后用流水;中洗30min。在无菌条件下用75%乙醇溶液浸泡杀菌30 S, 用0.1%的升汞溶液加吐温—20杀菌3、5、10、15min。0.1%升汞溶液灭菌效果随杀菌时间延长而提高,杀菌时间少于10min则无菌苗获得率小于13.5%,杀菌15min”无菌苗获得率为23.7%,外植体死亡率达33.3%。随着杀菌时间的延长升汞对植物材料的毒害作用加剧,以0.1%升汞溶液杀菌时间10—15min为宜。用无菌水;中洗3—5遍后,接种到MS固体培养基上。

2.芽的诱导
将接种后20d的无菌苗转移至培养基(1)上,5—7d茎尖开始萌动,10d腋芽萌动,芽逐渐长大,继续培养20d,茎段上所有腋芽均萌发成侧枝。侧枝生长正常,叶片深绿色,茎基部愈伤组织较少,黄绿色。

3.试管苗的增殖
将试管苗侧枝分割成2—3芽为一段,接种于培养基(2)上。10d后茎段叶芽萌动,30d长成大量侧枝,并有大量双生枝和三生枝产生。接种茎段形成具有5—8侧枝的丛生苗,平均增殖5.8倍。试管苗节间明显伸长,幼嫩叶片茎杆均呈淡红色,叶片大,茎杆较粗,组织不充实,茎基部愈伤组织大。以后每30d继代1次,经3—4次继代试管苗出现玻璃化现象。

4.壮苗培养
将经增殖培养的试管苗每继代3—4次后转移至培养基(3)上。40d后形成大量侧枝,平均每茎段4—6侧枝,侧枝平均长1.8cm,平均增殖3.1倍。基本无双生枝或三生枝。侧枝生长健;D,组织充实,叶色深绿,基部愈伤组织小,黄绿色,无玻璃化现象。

5.根的诱导
将生长健壮、长度大于1.2cm的侧枝分割,转移至培养基(4)上。提高光照度至2500—3000lx,延长光照时间至每天16h。培养15d后开始有根原基形成,根原基形成后即可炼苗。20—25d调查生根情况,生根率73%,每苗平均生根l—2条。

6.炼苗移栽
将生根试管苗带瓶移人栽培温室,培养1周。当根长0.5—1 omb寸,打开瓶盖炼苗3—5d,将生根苗取出,洗净根部培养基,栽植于育苗穴盘中。以黑泥碳为基质,温度控制在20—25℃之间,湿度为85%—95%左右,20d即可成活,成活率达73%以上。
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